Invitrogen™ CorrectASE™ Enzyme

Beschreibung

Das Invitrogen™ CorrectASE™ Enzym entfernt durch Oligonuceotid-Synthesefehler verursachte Fehlpaarungen, was zu einer 3- bis 10-fachen Reduzierung von Mutationen in Ihren synthetischen Genen oder Fragmenten führt. Durch die Einführung des Enzyms CorrectASE™ in Ihren Do-it-yourself-Gensyntheis-Arbeitsablauf können Sie:

• Die Anzahl der Mutationen in Ihrem synthetischen Gen oder Fragment reduzieren
• Die Arbeitszeit reduzieren, indem Sie nur 2–4 Klone anstatt 10–16 Klone pro synthetischem Konstrukt aussortieren
• Ihre Kosten senken, indem Sie nur 2–4 Klone statt 10–16 synthetische Gene sequenzieren

Ungewollte Mutationen verhindern
Handelsübliche synthetische Oligonuceotide weisen eine hohe Fehlerrate während der Synthese auf, die je nach Quelle von einem Fehler pro 300–1000 Basen reicht. Diese Fehler führen zu Frameshift (Deletion und Insertion) und Mismatch-Mutationen während der Gensynthese. Die Inkubation mit dem CorrectASE™ Enzym entfernt beide Mutationen.

Der Inkubationsschritt mit dem CorrectASE™ Enzym wird nach der anfänglichen PCR-Assemblierung der Oligonukleotide eingeführt. Das PCR-Produkt wird denaturiert und erneut hydrolysiert, sodass keine Mutationen auftreten. Das Enzym CorrectASE™ bindet sich an die resultierenden Fehlpaarungen und schneidet beide fehlerhaften 3’-DNA-Stränge ab. Die Exonukleaseaktivität von 3’ bis 5’ des Enzyms entfernt die Fehler. Eine abschließende PCR mit einer Proofreading-Polymerase assembliert dann die korrigierten Fragmente und erhöht so die Wahrscheinlichkeit, Klone mit der richtigen Reihenfolge zu isolieren. Abhängig von der eingehenden Oligonukleotid-Qualität müssen nur 2–4 Klone gescreent werden, im Vergleich zu 10–16 Klone in einem Workflow ohne Korrektur. Durch Einbeziehung des CorrectASE™-Enzyms in Ihren Gensynthese-Arbeitsablauf werden Arbeitszeit und Sequenzierungskosten reduziert.

Nur für Forschungszwecke Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen bestimmt.