Häufig gestellte Fragen zu Zellkulturschalen
1. Wie viele Zellen sollte ich aussäen, um eine Zellkultur zu beginnen?
Da sich die Zellen nach der Aussaat vermehren, ist es nicht empfehlenswert, die Zellen so auszusäen, dass die durchschnittliche Ausbeute pro Vertiefung bei 100 % Konfluenz überschritten wird. Je nach Zelltyp, Zellgröße und Zellwachstumsrate sowie der Anzahl der Tage Ihres Experiments können Sie Ihre Zellkultur mit unterschiedlichen Aussaatdichten beginnen. Nachstehend finden Sie die empfohlenen Aussaatdichten in verschiedenen Zellkulturschalen. Die Anzahl der Zellen auf einer konfluenten Platte oder Schale variiert je nach Zelltyp. Für die Tabelle wurden HeLa-Zellen verwendet. Der optimale Zelleinsatz für Ihre spezifischen Zelllinien kann durch erste Anzuchtversuche ermittelt werden.
Schalen | Oberfläche (cm2) | Aussaat-Dichte | Zellen im Konfluenzzustand |
|---|---|---|---|
35mm | 8.8 | 0.3 x 106 | 1.2 x 106 |
60mm | 21.5 | 0.8 x 106 | 3.2 x 106 |
100mm | 56.7 | 2.2 x 106 | 8.8 x 106 |
150mm | 145 | 5.0 x 106 | 20.0 x 106 |
Platten | Oberfläche (cm2) | Aussaat-Dichte | Zellen im Konfluenzzustand |
|---|---|---|---|
6-well | 9.6 | 0.3 x 106 | 1.2 x 106 |
12-well | 3.5 | 0.1 x 106 | 0.5 x 106 |
24-well | 1.9 | 0.05 x 106 | 0.24 x 106 |
48-well | 1.1 | 0.03 x 106 | 0.12 x 106 |
96-well | 0.32 | 0.01 x 106 | 0.04 x 106 |
2. Wie kann ich die richtige Wachstumsoberfläche für meine Zellkulturen auswählen?
Optisch klares und unbehandeltes Polystyrol mit einer hydrophoben Oberfläche ist ideal für Suspensionszellkulturen. Es ist auch für eine Vielzahl von biochemischen Tests geeignet. Eine standardmäßige Oberflächenmodifikation für Gewebekulturen (TC) macht die Polystyroloberfläche hydrophiler und ermöglicht eine maximale Adhäsion für eine Vielzahl von Zelltypen. Für Zellen wie Primärzellen und empfindliche Zellen, die auf der normalen TC-Oberfläche nicht gut wachsen, können Sie Zellkulturschalen verwenden, die mit Kollagen oder Polylysin beschichtet sind. Kollagen ist tierischen Ursprungs, während Polylysin vollständig synthetisch ist.
3. Haben Zellkulturplatten und -schalen ein Verfallsdatum?
Ja, das haben sie. Das Verfallsdatum bezieht sich in der Regel auf die garantierte Sterilität. Natürlich hängt die Sterilität auch von der richtigen Handhabung ab, damit die Verpackung intakt bleibt. Einige Kulturgefäße enthalten Zusatzstoffe wie Gelatine, die sich mit der Zeit zersetzen können. Es wird nicht empfohlen, diese Arten von Zellkulturgefäßen nach Ablauf des Verfallsdatums zu verwenden.