Invitrogen™ CyQUANT™ LDH Zytotoxizitäts-Assay

Beschreibung

Das CyQUANT™ LDH Zytotoxizitätsassay-Kit ist ein kolorimetrischer Assay, der eine einfache und zuverlässige Methode zur Bestimmung der zellulären Zytotoxizität bietet. Die Lactatdehydrogenase (LDH) ist ein zytosolisches Enzym, das in vielen verschiedenen Zelltypen vorkommt und bei Beschädigung der Plasmamembran in das Zellkulturmedium freigesetzt wird. Das CyQUANT LDH Cytotoxicity Assay Kit enthält die Reagenzien zur genauen und quantitativen Messung dieses extrazellulären LDH.

CyQUANT™ LDH Cytotoxicity Assay Kit bietet folgende Funktionen:

• — Praktisch: Hinzufügen-Mischen-Ablesen-Format für adhärente und Suspensionszellen, einschließlich 3D-Zellmodellen
• Präzise—ermöglicht eine quantitative Messung der LDH-Freisetzung
• Flexibel—ideal für das Hochdurchsatz-Screening und zum Überwachen der Zytotoxizität der gleichen Probe im Laufe der Zeit
• Stabil—nutzt die stabile LDH-Enzymaktivität als zytotoxischen Marker

LDH kommt als zytosolisches Enzym in vielen verschiedenen Zelltypen vor und ist ein etablierter und zuverlässiger Indikator für zelluläre Toxizität. Eine Beschädigung der Plasmamembran führt zu einer Freisetzung von LDH in das umgebende Zellkulturmedium. Diese extrazelluläre LDH kann durch eine gekoppelte enzymatische Reaktion quantifiziert werden, bei der LDH die Umwandlung von Lactat in Pyruvat über NAD+-Reduktion in NADH katalysiert. Die Diaphorase reduziert dann mit NADH ein Tetrazoliumsalz (INT) zu einem roten Formazan-Produkt, das bei 490 nm gemessen werden kann. Deshalb ist die Menge an gebildetem Formazan direkt proportional zur Menge an LDH, die in das Medium freigesetzt wurde.

Das CyQUANT™ LDH Cytotoxicity Assay Kit enthält die Reagenzien für eine einfache, zuverlässige kolorimetrische Quantifizierung zellulärer Zytotoxizität. Das Kit kann mit verschiedenen Zelltypen, einschließlich 3D-Zellmodellen, verwendet werden, um die Zytotoxizität, die durch chemische Verbindungen vermittelt wird, sowie die zellvermittelte Zytotoxizität zu messen. Da LDH im Medium als Indikator der zellulären Zytotoxizität dient, kann der Assay verwendet werden, um die Zytotoxizität innerhalb einer einzigen Probe im Laufe der Zeit zu überwachen. Zur Durchführung des Assays wird ein Aliquot des Zellkulturmediums auf eine neue Platte übertragen und das Reaktionsgemisch hinzugefügt. Nach einer 30-minütigen Inkubation wird die Reaktion durch Zugabe der Stopplösung beendet, und die Absorption wird mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät gemessen