Invitrogen™ Topo™ TA Cloning™ Kit für die Subklonierung, ohne kompetente Zellen

Beschreibung

Jedes Kit verwendet den pCR™ 2.1-TOPOTA-Vektor mit praktischen Restriktionsstellen für die Subklonierung. Die Klonierungs-Kits sind mit einer Vielzahl kompetenter Zellen (separat erhältlich) oder auch ohne kompetente Zellen erhältlich und damit ganz an Ihre Anforderungen und Ihr Budget angepasst. Resistent gegen Kanamycin (KanR) und Zeocin™ (ZeoR).

pCR™ 2.1-TOPO TA-Vektor: einfache Klonierung und Subklonierung
Der pCR 2.1-TOPO TA-Vektor ist mit 3'-Thymidin(T)-Überhängen für die direkte Ligation von Taq-Polymerase-amplifizierten PCR-Produkten (TA Cloning) linearisiert und mit kovalent gebundener Topoisomerase I “aktiviert”. Ligase muss nicht hinzugefügt werden und die Klonierung ist innerhalb von 5 Minuten abgeschlossen. EcoRI-Schnittstellen zu beiden Seiten der Einfügestelle des PCR-Produkts ermöglichen die problemlose Exzision von Inserts, oder verwenden Sie eine beliebige Kombination von 15 praktischen Restriktionsstellen, die Ihr PCR-Insert beiderseits einfassen und ein einfaches, direktionales Subklonieren ermöglichen.

pCR 2.1-TOPO TA-Klon-Selektion und -Manipulation
Der pCR 2.1-TOPO TA-Vektor enthält Ampicillin- und Kanamycin-Resistenzmarker und das LacZα-Gen für Blau-Weiß-Screening.

Vereinfachtes TOPO-basiertes Klonen
Mit dem TOPO-Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit spezifischen integrierten Sequenzen, noch Post-PCR-Verfahren, Vektorpräparation oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Geben Sie Ihre PCR-Reaktion einfach zum mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase, warten Sie 5 Minuten, und führen Sie die Transformation in kompetente E. coli-Zellen durch.

Effiziente Klonierung
Mit bis zu 95 % der Klone, die das gewünschte Insert tragen, können Sie das Screening der Klone reduzieren, was Zeit und Geld spart. Der in diesem Kit verwendete PCR 2.1-TOPO TA-Vektor enthält 3'-T-Überhänge für eine effiziente Ligation von Taq-Polymerase-amplifizierten PCR-Produkten, die 3'-A-Überhänge enthalten.

Der Standard für die Klonierung
Seit über 10 Jahren ist im Bereich der Klonierung das TOPO-Klonierungsverfahren für Tausende von Wissenschaftlern ein verlässlicher Partner. Die schnelle, einfache und effiziente TOPO Klonierung kam bereits bei einer Vielzahl von Vektoren und in unterschiedlichsten Anwendungen zum Einsatz.

TOPO TA Cloning Kits für die Subklonierung: Kit-Optionen
Das TOPO TA Cloning Kit für die Sequenzierung kann mit einer Vielzahl kompetenter Zellen erworben werden, die je nach Ihren Anforderungen unterschiedliche Vorteile bieten:

• Allgemeine Klonierung: Top10-Zellen (Kat.-Nr. K4500-01, K4500-40)
• Hocheffiziente Klonierung: TOP10 Electrocomp™ Zellen (Kat.-Nr. K4560-01, K4560-40)
• Klonierung allgemein, Resistenz gegen Bakteriophagen T1: DH5α-T1R-Zellen (Kat.-Nr. K4520-01, K4520-40)
• Schnelles Wachstum: Mach1™-T1R chemisch kompetente E. coli (Kat.-Nr. Nr. K4510-20)
• Stellen Sie Ihre eigenen Zellen bereit: Mehr Flexibilität und Kosteneffizienz (Kat.-Nr. Nr. 450641)

Zwei Versionen des Kits enthalten ein PureLink™ schnelles Plasmid-Miniprep-Kit (Kat.-Nr. K4500-02 und K4510-02) für die Isolierung von sauberem, sequenzbereiten, rekombinanten Plasmid und sind ebenfalls erhältlich.

• Schnell und praktisch: Von der PCR zum Klon in nur drei Schritten und 5 Minuten
• Effizient: Bis zu 95 % der Klone mit dem korrekten Insert
• Bewährt: Zuverlässige Leistung seit über einem Jahrzehnt mit über 4.000 Referenzen
• Einfach: keine Ligase, Post-PCR-Verfahren oder PCR-Primer bestimmter Sequenzen erforderlich
• Vektor: pCR 2.1-TOPO TA-Vektor: Subklonierungsvektor mit 15 praktischen Restriktionsstellen zu beiden Seiten Ihres Inserts gestatten ein einfaches, direktionales Subklonieren
• Klonierungsmethode: Klonierung mit TOPO TA: Ligation von PCR-Produkten auf Basis von Topoisomerase I in 5 Minuten mit 3′-A-Überhängen (Taq-Polymerase-amplifiziert) mit dem TOPO Vektor mit T-Überhängen
• Kompetente Zellen: Wählen Sie entweder aus den Kits mit allgemeinen, hocheffizienten, bakteriophagen T1–beständigen, schnell wachsenden kompetenten Zellen (separat erhältlich) oder verwenden Sie Ihr eigenes

Klonierung, PCR-Klonierung