Thermo Scientific™ Phusion Green Hot Start II High-Fidelity PCR Mastermix

Beschreibung

Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA Polymerases set a gold standard for high performance PCR. Featuring an error rate 50-fold lower than that of Taq, and 6-fold lower than that of Pfu, Phusion High-Fidelity DNA Polymerase is excellent choice for cloning and other applications requiring high fidelity. Phusion DNA Polymerases offer robust performance with short protocol times, even in the presence of PCR inhibitors, and generate higher yields with lower enzyme amounts than other DNA polymerase.

Phusion Hot-Start II High Fidelity DNA-Polymerase kombiniert die Phusion DNA-Polymerase mit einem reversibel gebundenen, spezifischen Affibody-Ligand. Der Affibody hemmt die DNA-Polymeraseaktivität bei Raumtemperatur und verhindert so die Amplifikation von unspezifischen Produkten.

Der Affibody-Ligand hemmt auch die 3‡→5‡-Exonuklease-Aktivität der Polymerase und verhindert so den Abbau von Primern und der Template-DNA beim Ansetzen der Reaktion. Bei Polymerisationstemperaturen wird der Ligand freigesetzt, was zur vollständigen Aktivierung der Polymerase führt. Die Phusion Hot-Start II DNA-Polymerase erfordert keinen separaten Aktivierungsschritt im PCR-Protokoll, da sie bei hohen Temperaturen sofort reaktiviert wird.

Die neue Phusion Green Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase ist eine Kombination aus Phusion Hot-Start II DNA-Polymerase und 5X Phusion Green-Puffer. Die Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel. Der Farbpuffer hat keine Auswirkungen auf die Leistung der Phusion Hot Start II DNA-Polymerase und ist mit Downstream-Anwendungen wie DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau kompatibel.

Die Thermo Scientific Phusion Hot Start II High Fidelity DNA-Polymerase ist die präziseste Heißstart-DNA-Polymerase auf dem Markt. Sie kombiniert die Phusion DNA-Polymerase mit einem reversibel gebundenen, spezifischen Affibody-Ligand. Das Affibody hemmt die DNA-Polymeraseaktivität bei Raumtemperatur und verhindert so die Amplifikation von unspezifischen Produkten.
Der Affibody-Ligand hemmt auch die 3'→5'-Exonuklease-Aktivität der Polymerase und verhindert so den Abbau von Primern und der Template-DNA während der Reaktionsvorbereitung. Bei Polymerisationstemperaturen wird der Ligand freigesetzt, was zur vollständigen Aktivierung der Polymerase führt. Die Phusion Hot-Start II DNA-Polymerase erfordert keinen separaten Aktivierungsschritt im PCR-Protokoll, da sie bei hohen Temperaturen sofort reaktiviert wird.
Die neue Phusion Green Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase ist eine Kombination aus Phusion Hot-Start II DNA-Polymerase und 5X Phusion Green-Puffer. Die Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel. Der Farbpuffer hat keine Auswirkungen auf die Leistung der Phusion Hot Start II DNA-Polymerase und ist mit Downstream-Anwendungen wie DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau kompatibel.


Besondere Merkmale

• Die Reaktionseinstellung kann bei Raumtemperatur erfolgen
• Reduziert unspezifische Amplifikation
• Verhindert die Verschlechterung des Primers während der Einrichtung
• Nullzeit-Reaktivierung aufgrund der einzigartigen Hot-Start-Technologie
• Sehr hohe Wiedergabetreue (52X Taq)
• Die Geschwindigkeit der Polymerase ermöglicht kurze Ausdehnungszeiten
• Robuste Reaktionen, minimales Optimierungserfordernis
• Höhere Produktausbeute bei geringen Enzymmengen
• Direktes Auftragen auf Gel mit dem Green Puffer

Anwendungen

• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Hoher Durchsatz
• Schwierige (GC-reiche) Templates
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Multiplex-PCR
• Long-Range-PCR
• Klonierung
• Mutagenese†
• Mikroarray

†Das Phusion Kit für die positionsspezifische Mutagenese ist ebenfalls erhältlich.

Enthält
Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase

• Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase (2 E/μl)
• 5X Phusion HF-Puffer
• 5X Phusion GC-Puffer
• DMSO
• 50 mM MgCl₂-Lösung

Phusion Green Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase

• Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase (2 E/μl)
• 5X Phusion Green HF-Puffer
• 5X Phusion Green GC-Puffer
• DMSO
• 50 mM MgCl₂-Lösung

Sowohl die Phusion- als auch die Phusion Green-Puffer ergeben 1,5 mM MgCl₂ in der 1X Endkonzentration.

Gefahrstoff: Nein
Haltbarkeit: 24 Monate
Versandbedingungen: Trockeneis
Lagerungspuffer: 20 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25 °C), 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, Stabilisatoren, 200 μg/ml BSA und 50 % Glycerin.
Lagerungsbedingungen: −20 °C