Thermo Scientific™ Pierce™ Polyacrylamid-Entsalzungssäulen

Pierce Polyacrylamid Spin Entsalzungssäulen, 7K MWCO, sind mit porösen Polyacrylamid-Beads vorverpackt und ermöglichen Pufferaustausch und Entsalzung von Proteinen und anderen makromolekularen Proben auf Basis von 7.000 Da MWCO (Molecular Weight Cut Off). Anders als Medien für Größenausschluss unterliegt Polyacrylamidharz keiner enzymatischen Degradation und dient nicht als Nährstoff für mikrobielles Wachstum. Das Harz ist sehr hydrophil, wodurch unerwünschte Bindungsinteraktionen zwischen Harz und Probenmolekülen minimiert werden. Eine Kontamination mit Zucker mit niedrigem Molekulargewicht (die mit vernetztem Dextran-Harz auftreten kann) stellt bei der Verwendung von Polyacrylamidharz kein Problem dar. Oxidationsmittel können entfernt werden, ohne den Träger zu zerstören. Dieses Harz ist anfällig für Hydrolyse von Amidgruppen unter Bedingungen mit extremem pH-Wert. Daher wird ein pH-Betriebswert von 2 bis 10 bei Raumtemperatur empfohlen. Das Polyacrylamidharz lässt sich auch bei pH-Wert 5,5 bis 6,5 30 Minuten lang bei 120 °C autoklavieren.

Die Säulen nutzen ein Harz, dessen Beads im feuchten Zustand 45 bis 90 µm Durchmesser haben, und sie eignen sich hervorragend für die Trennung von Peptiden und kleinen Makromolekülen (mit >7 kDa Größe) von Puffersalzen und anderen Verbindungen (unter 1 K MWCO).

Merkmale von Polyacrylamid-Harz:
• Stabil in Wasser, Salzlösungen, organischen Lösungsmitteln und unter alkalischen oder sauren Bedingungen
• Ausgezeichnete Fließeigenschaften
• Hitzebeständig

Anwendungen
• Entfernen von Salzen aus Proteinlösungen
• Entfernen von Phenolen aus Nukleinsäurezubereitungen
• Abscheiden überschüssiger Crosslinker aus Konjugatzubereitungen
• Entfernen überschüssiger Derivatmittel aus modifizierten Proteinen
• Entfernen von nicht reagierendem Farbstoff aus fluoreszierenden Antikörpern
• Abscheiden freier Isotopenmarkierungen aus markierten Proteinen
• Pufferaustausch