Thermo Scientific™ Phusion™ Plus DNA Polymerase

Beschreibung

Thermo Scientific Phusion Plus DNA Polymerase is a hot-start, high-fidelity DNA polymerase that brings together protein fusion technology and universal primer annealing. It is a Pyrococcus-like proofreading DNA polymerase fused to a processivity-enhancing domain, enabling Phusion Plus DNA Polymerase to generate PCR sequences with high accuracy, sensitivity, and inhibitor tolerance.

Die Phusion Plus DNA-Polymerase von Thermo Scientific ist eine Pyrococcus-ähnliche Proofreading-DNA-Polymerase, die zu einer prozessivitätsverbessernden Domäne fusioniert ist und es der Phusion Plus DNA-Polymerase ermöglicht, PCR-Sequenzen mit hoher Genauigkeit, Sensitivität und Inhibitor-Toleranz zu erzeugen.

• Hohe Genauigkeit:: für >100-mal höhere Sequenzgenauigkeit als Taq-Polymerase
• Praktischer Aufbau: ermöglicht eine universelle Annealing-Temperatur von 60 °C bei der PCR
• Erhöhte Spezifität: Hot-Start-Mechanismus reduziert die unspezifische Amplifikation und Primer-Degradation
• Arbeitsstabilität: automatisierungsfähig dank der 24-Stunden-Stabilität zusammengesetzter Reaktionen
• Hohe Inhibitor-Toleranz: funktioniert mit DNA von suboptimalem Reinheitsgrad

Der neuartige Phusion Plus Reaktionspuffer enthält urheberrechtlich geschützte Additive, die Primer/Template-Duplexe während des Annealing-Schritts bei 60 °C stabilisieren. Diese einzigartige Pufferformulierung erhöht die PCR-Spezifität, ohne dass die Glühtemperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Dadurch sparen Sie Zeit und vermeiden Fehler in PCR-Durchläufen. Darüber hinaus können mit Phusion Plus DNA-Polymerase und der universellen Annealing-Funktion verschiedene PCR-Reaktionen im selben Zyklus mit demselben Protokoll verarbeitet werden.

Phusion Plus DNA-Polymerase ist aufgrund seines Hot-Start-Mechanismus, der durch Affibody-Moleküle vermittelt wird, bei Umgebungstemperaturen inaktiv und ermöglicht damit die Einrichtung und Lagerung von zusammengesetzten PCR-Reaktionen bei Raumtemperatur. Die Enzymaktivität wird nach dem ersten Denaturierungsschritt vollständig wiederhergestellt.

Anwendungen

• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• GC-reiche PCR
• Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
• Mutagenese
• PCR mit hohem Durchsatz

Um die Einrichtung der PCR-Reaktion zu vereinfachen, ist Phusion Plus DNA-Polymerase auch in gebrauchsfertigen Master-Mix-Formaten erhältlich. Phusion Plus PCR Master Mix ist eine praktische 2X-Mischung aus Enzym, Reaktionspuffer, Magnesiumchlorid und dNTPs. Lediglich das Template und die Primer müssen zur PCR-Reaktion hinzugefügt werden. Phusion Plus Green PCR Master Mix enthält zusätzlich ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele.