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Thermo Scientific™ NotI (10 U/μl)
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Ad2 DNA verdaut mit NotI, 0,7 % Agarose, 7 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'..G C▵G G C C G C...3'
3'..C G C C G G▵C G...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Buffer O 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- NotI wird geliefert in: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8 bei 25°C), 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,02 % Triton X-100, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit NotI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: vollständige Überlappung — blockiert
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Adenovirus-2-DNA in 16 Stunden erforderlich
Kompatible Enden:
- Bsp120I, CfrI, Eco52I
Hinweis:
Analysiert mit pTZ19RJL2-Plasmid-DNA, verdaut mit BseLI. Supercoiled Plasmid-DNA erfordert für den vollständigen Verdau möglicherweise bis zu 5x mehr NotI als lineare DNA.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Empfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, Not Dcm Methylation-Sensitive |
| Enzym | Nicht I |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer O |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 1500 U |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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