Thermo Scientific™ Maxima Reverse Transcriptase (200 U/μl)

Beschreibung

Maxima Reverse Transkriptase (RT) wurde durch In-vitro-Evolution von M-MuLV RT entwickelt. Das Enzym besitzt RNA- und DNA-abhängige Polymerase-Aktivität sowie RNase H-Aktivität. Das genetisch veränderte Enzym zeichnet sich im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT durch eine wesentlich höhere Thermostabilität, Robustheit und cDNA-Syntheseraten aus.

Die Maxima Reverse Transkriptase ermöglicht reproduzierbare cDNA-Synthesen über einen großen Bereich von Gesamt-RNA-Mengen hinweg (von 1 pg bis 5 µg) und bei höheren Temperaturen (50 bis 65 °C) , was dieses Enzym zum idealen Hilfsmittel für zweistufige RT-qPCR macht (siehe unterstützende Daten).

Aufgrund seiner hohen Thermostabilität behält das Maxima-Enzym die volle Aktivität während der gesamten Reverse Transkriptionsreaktion bei, erzeugt die höchsten Erträge an cDNA und kann selbst sehr lange RNA-Transkripte bis 20 kb synthetisieren (siehe unterstützende Daten). Die Reaktionstemperatur kann zur effizienten Transkription von RNA-Bereichen mit einer hohen Sekundärstruktur oder zur Verbesserung der Spezifizität von genspezifischen Primern bis auf 65 °C erhöht werden. Aufgrund der erhöhten Syntheserate kann die reverse Transkriptionsreaktion in 15 bis 30 Minuten ausgeführt werden.

Die Thermo Scientific Maxima Reverse Transkriptase wurde durch die In-vitro-Evolution von M-MuLV-RT hergestellt. Das Enzym bietet RNA-abhängige und DNA-abhängige Polymeraseaktivität, sowie RNase H-Aktivität. Das veränderte Enzym zeichnet sich durch eine hohe Thermostabilität und Robustheit aus und bietet im Vergleich zur Wildtyp-M-MuLV-RT eine höhere cDNA-Syntheserate.
Die Maxima Reverse Transkriptase ist geeignet für die reproduzierbare cDNA-Synthese über einen grossen Bereich von RNA-Gesamtmengen (1 pg bis 5μg) bei erhöhten Temperaturen (50-65°C). Durch die hohe Thermostabilität erhält das Enzym seine volle Aktivität während der gesamten reversen Transkriptionsreaktion aufrecht, generiert hohe Ausbeuten an cDNA und kann sehr lange RNA-Transkripte von bis zu 20 kb synthetisieren. Die Reaktionstemperatur kann für die effiziente Transkription von RNA-Regionen mit Sekundärstrukturen oder beim Gebrauch von genspezifischen Primern zur Verbesserung der Spezifität bis zu 60°C erhöht werden.
Vorteile
Hohe Ausbeuten von cDNA voller Länge bis zu 20 kb
Aktiv bis zu 65°C
Thermostabil - 90% aktiv nach einer 60-minütigen Inkubation bei 50°C
Effizient - vollständige cDNA-Synthese in 15-30 Minuten
Hohe Sensitivität - reproduzierbare cDNA-Synthese über einen grossen Bereich von RNA-Gesamtmengen (1 pg bis 5μg)
Baut modifizierte Nukleotide ein
Anwendungen
2-step RT-PCR
2-step RT-qPCR
Erst-Strang cDNA-Synthese
Erstellung von full length cDNA-Bibliotheken
DNA Labeling
Packungsinhalt
Die Maxima Reverse Transkriptase wird mit 5x Reaktionspuffer (250 mM Tris-HCl (pH 8,3 bei 25°C), 375 mM KCl, 15 mM MgCl2, 50 mM DTT) geliefert.
Hersteller: EP0741 Art.-Nr.
Beschreibung: Maxima Reverse Transcriptase
Menge: 2000 U (200 U/uL)