Invitrogen™ Zero Blunt™ PCR-Klonierungskit, ohne kompetente Zellen

Description

Das Zero Blunt™ PCR-Klonierungskit nutzt den vielseitig verwendbaren Klonierungsvektor pCR™-Blunt und ExpressLink™ T4-DNA-Ligase, um ein Ligationsprodukt in einem Ligationsschritt von 5 Minuten bei Raumtemperatur zu erzeugen.
Der pCR-Blunt Vektor bietet:

• EcoRI-Schnittstellen zu beiden Seiten der Einfügestelle des PCR-Produkts zur Exzision von Inserts
• T7-Promoter/Primer-Stelle zur In-vitro-RNA-Transkription und Sequenzierung
• M13-Vorwärts- und Rückwärtsprimer-Stellen für Sequenzierung oder PCR-Screening

Funktionsweise der Zero Blunt PCR-Klonierung
Das Zero Blunt PCR Cloning Kit ermöglicht die Klonierung von PCR-Fragmenten – oder eines beliebigen DNA-Fragments – mit glatten Enden (blunt ends), mit einem schwachen Hintergrund nicht rekombinanter Klone. Der pCR-Blunt Vektor enthält das tödliche E. coliccdB-Gen, fusioniert mit dem C-Terminus von LacZα (Bernard et al., 1994). Die Ligation eines PCR-Produkts mit glattem Ende unterbricht die Expression der lacZα-ccdB-Genfusion, wodurch nur das Wachstum von positiven Rekombinanten nach der Transformation ermöglicht wird. Zellen, die nicht rekombinanten Vektor enthalten, werden getötet, wenn das Transformationsgemisch plattiert wird.
Kit-Konfigurationen
Das Zero Blunt PCR-Klonierungskit wird in einer Vielzahl von Konfigurationen angeboten: Mit One Shot™ TOPO10 chemisch kompetenten E. coli (K2700-20 und K2700-40) und ohne kompetente Zellen (K2750-20 und K2750-40) in Kitgrößen mit 20 und 40 Reaktionen.

• Schnell und bequem: 5-minütige Ligation bei Raumtemperatur
• Effizient: Gen ccdB für positive Selektion führt zu > 80 % Klonen mit korrektem Insert
• Flexibel: Wahl von Kanamycin- oder Zeocin™-Resistenz für eine flexible Antibiotikaauswahl

Klonierung, PCR-Klonierung

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