Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit für die Sequenzierung, mit One Shot™ TOP10 chemisch kompetenten E. coli

Beschreibung

Diese Kits enthalten alles Notwendige zur Klonierung und Selektion rekombinanter Vektoren, die das PCR-Fragment Ihrer Wahl enthalten. Jedes Kit verwendet den pCR™4-TOPO TA-Vektor mit spezieller Sequenzierung der Primerstellen, die bei jeder Reaktion mehr Insert-Sequenz und weniger Vektorsequenz ergeben; sie sind je nach Ihren Anforderungen und Ihrem Budget mit einer Vielzahl von kompetenten Zellen oder ohne kompetente Zellen erhältlich.
TOPO TA Cloning Kits für die Sequenzierung: Übersicht
Vektor: pCR4-TOPO TA-Vektor: Optimierter Klonierungsvektor für verbesserte Sequenzierungsergebnisse
Klonierungsmethode: TOPO TA Cloning: Ligation von PCR-Produkten auf Basis von Topoisomerase I in 5 Minuten mit 3'A-Überhängen (Taq-amplifiziert) zum Vektor
Kompetente Zellen: Wählen Sie entweder aus den Kits mit allgemeinen, hocheffizienten, bakteriophagen T1-beständigen, schnell wachsenden kompetenten Zellen oder verwenden Sie Ihr eigenes
pCR4-TOPO TA-Vektor: Optimiert zur Sequenzierung
Ein Großteil der multiplen Klonierungsstellen wurde vom pCR4-TOPO TA-Vektor entfernt, um den Abstand zwischen Sequenzierprimer- und Insert-Stelle auf maximal 33 bp zu verkürzen. Dies bedeutet, dass Sequenzierreaktionen weniger Vektorsequenz und mehr Insertsequenz ergeben. Der pCR4-TOPO TA-Vektor bietet Bindungsstellen für 4 Standard-Sequenzierungsprimer: M13 forward, M13 reverse, T7 und T3. Davon enthalten die Kits je einen Aliquot.
pCR4-TOPO TA-Klon-Selektion und -Manipulation
Der pCR4-TOPO TA-Vektor enthält Ampicillin- und Kanamycin-Resistenzmarker und eine LacZα-ccdB-Genfusion für die Positivselektion und das Blau-Weiß-Screening. Die minimierte multiple Klonierungsstelle des Vektors umfasst abgrenzende EcoRI-Schnittstellen für eine vereinfachte Exzision klonierter PCR-Produkte und eine einzigartige Sse8387I-Stelle für Nested Deletions vor der Sequenzierung. T7- und T3-Promoter sind auch für die In-vitro-Transkription vorhanden.
Vereinfachte TOPO basierte Klonierung
Mit dem TOPO Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit spezifischen integrierten Sequenzen, noch Post-PCR-Verfahren, eine Vektorpräparation oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Geben Sie Ihre PCR-Reaktion einfach zum mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase, warten Sie 5 Minuten, und führen Sie die Transformation in kompetente E. coli-Zellen durch.
Effiziente Klonierung
Mit bis zu 95 % der Klone, die das gewünschte Insert tragen, können Sie das Screening der Klone reduzieren und somit Zeit und Geld sparen. Der in diesem Kit verwendete pCR4-TOPO TA-Vektor enthält 3'T-Überhänge für eine effiziente Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten mit 3'A-Überhängen.
Der Standard für die Klonierung
Seit über zehn Jahren verlassen sich Tausende Wissenschaftler bei der Klonierung auf das TOPO™ Verfahren. Die schnelle, einfache und effiziente TOPO™ Klonierung kam bereits bei einer Vielzahl von Vektoren und in unterschiedlichsten Anwendungen zum Einsatz.
TOPO TA Cloning Kits für die Sequenzierung: Kit-Optionen
Das TOPO TA Cloning Kit für die Sequenzierung ist mit einer Vielfalt kompetenter Zellen erhältlich, die verschiedene Vorteile entsprechend Ihren Anforderungen bieten:

• Allgemeine Klonierung: TOP10 (Kat.-Nr. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Hocheffiziente Klonierung: TOP10 Electrocomp™ Zellen (Kat.-Nr. K4580-01, K4580-40)
• Klonierung allgemein, Resistenz gegen Bakteriophagen T1: DH5α-T1R (Kat.-Nr. K4595-01, K4595-40)
• Schnelles Wachstum: Mach1™-T1R chemisch kompetente E. coli (Kat.-Nr. K4530-20)
• Stellen Sie Ihre eigenen Zellen bereit: Mehr Flexibilität und Kosteneffizienz (Kat.-Nr. 450030)

• Mehr Sequenz: Ermöglicht mehr Insertsequenz und weniger Vektorsequenz bei der Verwendung von Standard-Sequenzierungs-Primern
• Schnell und praktisch: Von der PCR zum Klon in nur drei Schritten und 5 Minuten
• Effizient: Bis zu 95 % der Klone mit dem korrekten Insert
• Bewährt: Zuverlässige Leistung seit über einem Jahrzehnt mit über 4.000 Referenzen

Chromatin-Biologie, Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), Klonierung, Methylierungsanalyse, PCR-Klonierung, RNAi, Epigenetik und Non-Coding RNA-Forschung, Sequenzierung von Bisulfit-Treated DNA