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Invitrogen™ SuperScript™ III First-Strand Synthesis SuperMix
Optimiert für die Synthese von Erststrang-cDNA aus gereinigter Poly(A+)- oder Gesamt-RNA
Marke: Invitrogen™ 18080400
Beinhaltet: 2X Reaktionsgemisch (500 μl); SuperScript III Enzymgemisch (100 μl); Oligo(dT)20 (50 μl insgesamt bei 50 μM); Random-Hexamers (50 μl insgesamt bei 50 ng/μl); Annealing-Puffer (50 μl)
Beschreibung
Mit diesem System können RNA-Ziele von 100 bp bis > 12 kb nachgewiesen werden. Die Menge des Ausgangsmaterials kann im Bereich von 0,1 pg bis 5 μg der Gesamt-RNA liegen.
- Das Kit enthält SuperScript™ III/RNaseOUT™ Enzymgemisch, 2X Erststrang-Reagenzmischung und Annealing-Puffer.
- SuperScript™ III Reverse Transkriptase, im Enzym-Mix enthalten, ist eine Version von M-MLV RT, die zur Reduzierung der RNase-H-Aktivität entwickelt wurde und eine höhere thermische Stabilität bietet.
- Das Enzym kann für die Synthese von cDNA bei Temperaturen von 45 °C bis 55 °C verwendet werden und weist eine bessere Spezifität, höhere cDNA-Ausbeute und mehr Produktvollständigkeit auf als andere reverse Transkriptasen.
- Da SuperScript™ III RT nicht signifikant von Ribosomal- und Transfer-RNA gehemmt wird, kann es für die Synthese von cDNA aus Gesamt-RNA verwendet werden.
- Der RNaseOUT™ Recombinant RNase Inhibitor ist im Enzyme Mix enthalten und schützt vor der Degradation der Ziel-RNA aufgrund von Ribonuklease-Kontamination.
- Der 2X Erststrang-Reaktionsmix umfasst 10 mM MgCl2 und 1 mM von jedem dNTP in einer Puffer-Formulierung, die für die Erststrang-Synthese von cDNA optimiert wurde.
- Der Annealing-Puffer wird im ersten Template-Primer-Annealing-Schritt verwendet.
- Separate Röhrchen mit Oligo(dT)20 und Random-Hexamers werden ebenfalls bereitgestellt. Die cDNA-Synthese kann entweder mit Gesamt-RNA oder Poly(A)+-RNA, geprimt mit Oligo(dT), Random-Primern oder einem genspezifischen Primer durchgeführt werden.
- Optimale Reaktionstemperatur: 50 °C
- Ausreichend Material für 50 Reaktionen (je 20 μl)
PCR & Real-Time PCR, reverse Transkription
Bestellinformation
Versandbedingung: Trockeneis
Spezifikation
• 2X-Reaktionsgemisch, 500 μl |
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Hoch | |
Reverse Transkription | |
Random-Primer, OligodT Primer | |
SuperScript III | |
Real-Time PCR (qPCR) | |
50 Reaktionen | |
Reverse Transkription |
Kit | |
50 min | |
50 °C | |
50 rxns | |
Trockeneis | |
cDNA (Erststrang) | |
Master Mix | |
RNA |
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.