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Invitrogen™ pENTR™/TEV/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ Mach1™-T1R Chemically Competent E. coli
Verwenden Sie diese hocheffiziente, fünf-minütige Klonierungsstrategie, um ein PCR-Produkt mit stumpfem Ende in den Vektor zu klonieren
Marke: Invitrogen™ K253520
609.84 EUR gültig bis 2024-12-20
Benutzen Sie den Promotions-Code "21651" um Ihren Promotions-Preis zu erhalten.
Beinhaltet: pENTR/TEV/D-TOPO Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, OneShot Machl T1 Phagenresistentes chemisches E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid.
Beschreibung
- PCR-Produkte mit stumpfen Enden klonen mit einer Effizienz von über 90 % direktional in den pENTR/TEV/D-TOPO Entry-Vektor und umfassen eine TEV-Protease-abhängige Spaltstelle zur Entfernung von Tags am N-Terminus aus exprimierten Proteinen
- Rasches Hin- und Herschicken klonierter Gene zwischen mehreren Vektorsystemen
- Zuverlässige Leistung
- Für Zugang zum Gateway System eine PCR-Amplifikation des zu untersuchenden Gens durchführen und Produkt direkt an den mitgelieferten mit Topoisomerase geladenen pENTR/SD/D-TOPO Vektor anhängen. Danach 5 Minuten lang inkubieren und die mitgelieferten kompetenten E. coli-Zellen transformieren
- Die daraus resultierenden Gateway Entry attL-Klone sind nun für eine effiziente Rekombination mit ausgewählten Vektoren bereit.
- Der PENTR/TEV/D-TOPO-Vektor enthält eine Erkennungsstelle für das Tobacco Etch Virus (TEV) zur Protease-abhängigen Spaltung eines N-terminalen Tags aus rekombinantem Protein
- Der Vektor verfügt über die Primer-Sequenzierstellen M13 und T7 sowie über attL-Rekombinationsstellen an beiden Seiten der PCR-Produkt-Eingabestelle, was eine einfache Sequenzüberprüfung und Rekombination in eine Reihe von attR-haltigen Gateway Zielvektoren ermöglicht
- Ein Kanamycin-Resistenz-Gen und ein pUC-Ursprung dienen der Selektion und hohen Kopiepropagation in E. coli
- Ein vierbasiger Überhang auf den Vektorpaaren mit vierbasiger Sequenz im Vorwärtsprimer der PCR-Reaktion sorgt für Direktionalität hin zur Topoisomerase-Ligationsreaktion
Klonierung, Gateway-Klonierung
Spezifikation
Direktionales TOPO™ | |
20 reactions | |
TOPO-Klonierungskit | |
pENTR |
Das pENTR™⁄TEV⁄-D-TOPO™ Klonierungskit enthält pENTR⁄TEV⁄-D-TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, One Shot™ Machl™ T1-Phagenresistente chemische E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. Lagerung kompetenter E. coli bei -80 °C. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. | |
One Shot™ | |
N-Terminus |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.