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Invitrogen™ pENTR™/D-TOPO™ Klonierungskit mit One-Shot™ TOP10 chemisch kompetentem E. coli
Effiziente, fünfminütige Klonierungsstrategie zum direkten Klonieren von PCR-Produkten mit stumpfen Enden in einen Entry-Vektor für das Gateway System oder MultiSite Gateway System
Marke: Invitrogen™ K240020
545.44 EUR gültig bis 2024-11-30
Benutzen Sie den Promotions-Code "21651" um Ihren Promotions-Preis zu erhalten.
Beinhaltet: pENTR/D-TOPO Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, chemisches OneShot TOP10 E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid.
Beschreibung
- Stumpfendige PCR-Produkte können direktional mit mehr als 90%iger Effizienz kloniert werden, ohne Ligase, Verfahren nach der PCR oder Restriktionsenzyme.
- Rasches Hin- und Herschicken klonierter Gene zwischen mehreren Vektorsystemen
- Zuverlässige Leistung
- Direktionaler Klonierungsvektor zur Eingabe in das Gateway-System
- Für Zugang zum Gateway System eine PCR-Amplifikation des zu untersuchenden Gens durchführen und Produkt direkt an den mitgelieferten mit Topoisomerase geladenen pENTR/D-TOPO-Vektor anhängen. Danach 5 Minuten lang inkubieren und die mitgelieferten kompetenten E. coli-Zellen transformieren
- Die daraus resultierenden attL-enthaltenden Gateway Entry-Klone sind nun für eine effiziente Rekombination mit den gewünschten Gateway Zielvektoren bereit
- Der pENTR/D-TOPO-Vektor umfasst M13- und T7-Primer-Sequenzierungsstellen und attL-Rekombinationsstellen, die an der Einfügestelle des PCR-Produkts angebracht sind, wodurch Klone einfach sequenzgeprüft und in die Auswahl von attR-haltigen Gateway Zielvektoren umkombiniert werden können
- Ein Kanamycin-Resistenz-Gen und ein pUC-Ursprung dienen der Selektion und hohen Kopiepropagation in E. coli
- Ein vierbasiger Überhang auf den Vektorpaaren mit vierbasiger Sequenz im Vorwärtsprimer der PCR-Reaktion sorgt für Direktionalität hin zur Topoisomerase-Ligationsreaktion
- Verhindert die Einschränkungen der Klonierung mittels Restriktion und erlaubt so Zugang zu praktisch jedem Expressionssystem in einer einstündigen, zu 99 % effizienten und reversiblen Gateway Rekombinationsreaktion
- Bewegen Sie dieselbe DNA-Sequenz zwischen verschiedenen Vektoren ohne Anwendung von Restriktionsenzymen, Ligase, Subklonierungsschritten, Screening von zahllosen Kolonien oder Resequenzierungen, um Zeit, Kosten und Aufwand zu sparen
Klonierung, Gateway-Klonierung
Spezifikation
Direktionales TOPO™ | |
20 reactions | |
TOPO-Klonierungskit |
Das pENTR™⁄D-TOPO™ Cloning Kit enthält pENTR⁄D-TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, chemische OneShot™ TOP10 E. coli, S.O.C.- Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. Lagerung kompetenter E. coli bei -80 °C. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. | |
One Shot™ | |
pENTR |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.