Invitrogen™ GeneBLAzer™ ER Alpha DA Assay Kit

Beschreibung

GeneBLAzer™ER-alpha DA(Division Arrested)-Zellen und ER alpha-UAS-bla GripTite™ Zellen enthalten die Liganden-bindende Domäne (LBD) des humanen Östrogenrezeptor-alpha (ER-alpha), fusioniert mit der DNA-bindenden Domäne von GAL4, welches stabil in die GeneBLAzer™UAS-bla GripTite™ Zelllinie integriert ist. GeneBLAzer™UAS-bla GripTite™ Zellen exprimieren stabil ein Beta-Lactamase-Reportergen unter der Transkriptionskontrolle einer Upstream-Aktivatorsequenz (UAS). Wenn ein Agonist an die LBD des GAL4 (DBD)-ER-alpha (LBD)-Fusionsproteins bindet, bindet das Protein an die UAS, was zu einer Expression von Beta-Lactamase führt. DA-Zellen sind in zwei Konfigurationen erhältlich: Einem Assay-Kit (das Zellen und ausreichend Substrat für die Analyse von einer 384-Well-Platte enthält) und einem Zellröhrchen, das für die Analyse von 10 x 384-Well-Platten ausreicht. DA-Zellen werden irreversibel mit einer niedrig dosierten Behandlung von Mitomycin C in ihrer Teilung arretiert und weisen keine offensichtliche Toxizität oder Veränderung der zellulären Signaltransduktion auf. Sowohl ER-Alpha-DA-Zellen als auch ER-Alpha-UAS-bla GripTite™-Zellen sind für Z' und EC₅₀-Konzentrationen von 17-beta Estradiol funktional validiert Darüber hinaus wurden ER alpha-UAS-bla GripTite™ Zellen unter variablen Bedingungen auf Assay-Leistung getestet, einschließlich DMSO-Konzentration, Zellzahl, Stimulations- und Substratladezeiten (Daten auf Anfrage erhältlich). Weitere Testdaten mit alternativen Stimuli sind ebenfalls verfügbar.