Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, electrocompetent cells

Beschreibung

Das GeneArt Gibson HiFi Assemblierungs-Klonierungskit ermöglicht die DNA-Assemblierung und das Klonen mithilfe einer Technik, mit der mehrere sich überlappende DNA-Fragmente in einer isothermen Reaktion von 15–60 Minuten in einem Schritt nahtlos miteinander verbunden werden können. DNA-Fragmente unterschiedlicher Länge werden einheitlich mit komplementären Überlappungen zwischen Fragmenten zusammengesetzt. Die inhärente Flexibilität dieses Ansatzes eignet sich für kleine und große DNA-Konstrukte und umfasst sowohl einzelne als auch mehrere Einsätze. Die resultierenden Produkte können für eine Vielzahl von Downstream-Prozessen verwendet werden, einschließlich Transformation, PCR- und Rollkreis-Amplifikation (RCA). Das GeneArt Gibson HiFi Assemblierungs-Klonierungskit, elektrokompetente Zellen, ist ein komplettes Kit, das Mastermix, Positivkontrolle, Wasser und ElectroMAX DH10B elektrokompetente E. coli enthält.

Zu den Merkmalen des GeneArt Gibson HiFi Assemblierungs-Klonierungskits gehören:

• Einfach — assemblieren und klonen Sie nahtlos bis zu sechs DNA-Fragmente in einer einzigen Reaktion
• Effizient — hohe Wiedergabetreue sorgt für mehr korrekte Klone als andere Methoden
• Flexibel — die Designrichtlinien ermöglichen die Montage in jeden Vektor Ihrer Wahl
• Praktisch — erhältlich als Master Mix Kits und Klonierungskits komplett mit chemischen oder elektrokompetenten Zellen
• Vertrauenswürdig — über 4000 Erwähnungen in der wissenschaftlicher Literatur, die großen Erfolg hervorheben

Nahtlose Zusammenstellung mehrerer Fragmente

GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsklonierung ist ein einfacher, einstufiger Prozess, bei dem bis zu sechs Fragmente in einem proprietären enzymatischen Mix kombiniert werden, um DNA-Fragmente mit gemeinsam genutzter Endhomologie zusammenzubauen, ohne dass zusätzliche Sequenzen oder Narben zurückgelassen werden (nahtlos). Nach einer 15–60-minütigen Inkubation wird ein Teil der Assemblierungsreaktion in chemisch kompetente oder elektrokompetente Zellen umgewandelt, wodurch Klone entstehen, die am nächsten Tag zur Analyse bereit sind. Die erforderliche 20- bis 40-Basenpaar-Endhomologie ist für die Synthese in das De-novo-Fragment integriert oder kann einfach durch PCR-Amplifikation mit kundenspezifischen DNA-Oligos entwickelt werden. Diese spezielle Enzymmischung erzeugt ein nahtloses und kovalent gebundenes DNA-Konstrukt, das eine hohe Effizienz bietet.

Robuste Methode für maximale Effizienz

Aufgrund des kovalent gebundenen Endprodukts ermöglicht die GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsmethode die Verwendung von chemisch kompetenten Zellen oder elektrokompetenten Zellen für höchste Transformationseffizienz und verbessert so den Erfolg bei der Suche nach dem richtigen Klon, insbesondere für anspruchsvollere Konstrukte. Restriktionsenzyme, Ligationen oder Rekombinationsstellen sind nicht erforderlich und die Methode bietet ein perfekt nahtloses Konstrukt ohne ungewollte Extrabasen.

Bietet große Vielseitigkeit

Die GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsmethode bietet Vielseitigkeit, kann viele Techniken durch die schnelle Kombination, Hinzufügung, Löschung oder den Austausch von DNA-Segmenten optimieren und macht das Subklonen überflüssig, was Zeit und Aufwand im Klonierungsablauf spart.