Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly EX Cloning Kit, chemically competent cells

Beschreibung

Das GeneArt Gibson EX Assemblierungs-Klonierungskit ermöglicht die DNA-Assemblierung über eine Technik, mit der bis zu 15 überlappende DNA-Fragmente nahtlos in einer für zwei Schritte optimierten Reaktion mit einem Röhrchen verbunden werden können. DNA-Fragmente unterschiedlicher Länge werden einheitlich mit komplementären Überlappungen zwischen Fragmenten zusammengesetzt. Die inhärente Flexibilität und der Erfolg dieses Ansatzes eignen sich für kleine und große DNA-Konstrukte, umfassen sowohl einzelne als auch mehrere Einsätze und wurden für die Erstellung ganzer Genome verwendet. Die resultierenden Produkte können für eine Vielzahl von Downstream-Prozessen verwendet werden, einschließlich Transformation, PCR- und Rollkreis-Amplifikation (RCA). Das GeneArt Gibson EX Assemblierungs-Klonierungskit, chemisch kompetente Zellen, ist ein komplettes Kit, das Mastermix, Positivkontrolle, Wasser und One Shot TOP10 chemisch kompetente E. coli enthält.

Zu den Merkmalen des GeneArt Gibson EX Assemblierungs-Klonierungskits gehören:

• Einfach — assemblieren und klonen Sie nahtlos bis zu 15 DNA-Fragmente in einer einzigen Reaktion
• Effizient — robuste Effizienz ermöglicht erfolgreiche Klone für einfache und anspruchsvolle Konstrukte
• Flexibel: die Designrichtlinien ermöglichen die Montage in jeden Vektor Ihrer Wahl
• Praktisch — erhältlich als Master Mix Kits und Klonierungskits komplett mit chemischen oder elektrokompetenten Zellen
• Vertrauenswürdig — über 4000 Erwähnungen in der wissenschaftlicher Literatur, die großen Erfolg hervorheben

Nahtlose Assemblierung von bis zu 15 Fragmenten

GeneArt Gibson EX Assemblierungsklonierung ist ein robuster, zweistufiger Prozess mit einem Röhrchen, bei dem bis zu 15 Einsätze und der Vektor in einem proprietären enzymatischen Mix kombiniert werden, um DNA-Fragmente mit gemeinsam genutzter Endhomologie zusammenzubauen, ohne dass zusätzliche Sequenzen oder Narben zurückgelassen werden (nahtlos). Nachdem diese dual optimierte Reaktion abgeschlossen ist, wird ein Teil der Baugruppenreaktion in chemisch kompetente oder elektrokompetente Zellen umgewandelt, wodurch Klone am nächsten Tag zur Analyse bereit sind. Die erforderliche 20- bis 40-Basenpaar-Endhomologie ist für die Synthese in das De-novo-Fragment integriert oder kann einfach durch PCR-Amplifikation mit kundenspezifischen DNA-Oligos entwickelt werden. Diese spezielle Enzymmischung erzeugt ein nahtloses und kovalent gebundenes DNA-Konstrukt, das eine hohe Effizienz bietet.

Robuste Methode für maximale Effizienz

Aufgrund des kovalent gebundenen Endprodukts ermöglicht die GeneArt Gibson EX Assemblierungsmethode die Verwendung von chemisch kompetenten Zellen oder elektrokompetenten Zellen für höchste Transformationseffizienz, besonders wichtig für anspruchsvolle Konstrukte. Restriktionsenzyme, Ligationen oder Rekombinationsstellen sind nicht erforderlich und die Methode bietet ein perfekt nahtloses Konstrukt ohne ungewollte Extrabasen.

Bietet große Vielseitigkeit

Die GeneArt Gibson EX Assemblierungsmethode bietet Vielseitigkeit, kann viele Techniken durch die schnelle Kombination, Hinzufügung, Löschung oder den Austausch von DNA-Segmenten optimieren und macht das Subklonen überflüssig, was Zeit und Aufwand im Klonierungsablauf spart.