Thermo Scientific™ S1 Nuclease (100 U/μl)

Beschreibung

S1 Nuclease degradiert einsträngige Nukleinsäuren und setzt 5‘-Phosphoryl-Mono- oder -Oligonukleotide frei. Sie ist fünfmal aktiver auf DNA als auf RNA. Außerdem spaltet S1 Nuclease dsDNA in einsträngigen Bereichen, die durch einen Bruch, eine Lücke, eine Fehlpaarung oder einen Loop verursacht wurden. S1 Nuclease zeigt 3'-Phosphomonoesterase-Aktivität.

Das Enzym ist ein Glykoprotein mit einem Kohlenhydratgehalt von 18 %.

• Quelle: Aspergillus oryzae
• Molekulargewicht: 29 kDa Monomer

• Das Fehlen kontaminierender doppelsträngiger DNA-spezifischer Nukleaseaktivität wurde durch eine entsprechende Qualitätsprüfung bestätigt
• Funktionell getestet für die Erzeugung unidirektionaler Deletionen in DNA-Fragmenten (in Verbindung mit Exonuklease III)

• Aspergillus oryzae

• 29 kDa Monomer

• Eine Einheit des Enzyms erzeugt 1 μg säurelösliche Desoxyribonukleotide in 1 Minute bei 37°C
• Die Enzymaktivität wird in folgender Mischung gemessen: 30 mM Natriumacetat (pH 4,5), 50 mM NaCl, 0,1 mM ZnCl₂, 5 % (v/v) Glycerin, 800 μg/ml wärmedenaturierte Kälberthymus-DNA

• Das Enzym wird in 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 50 mM NaCl, 0,1 mM ZnCl₂ und 50 % (v/v) Glycerin geliefert

• 200 mM Natriumacetat (pH 4,5 bei 25°C), 1,5 M NaCl und 10 mM ZnSO₄

• Inhibitoren: Metallchelatoren, PP_P, P_i, 5'-Ribonukleotide und Desoxyribonukleotide
• Inaktivierung durch 10-minütiges Erhitzen auf 70°C in der Gegenwart von EDTA

Empfohlen für:

Entfernen einsträngiger Überhänge von DNA-Fragmenten. (2); S1-Transkriptkartierung. (3, 4); Spaltung von Hairpin Loops; Erzeugung unidirektionaler Löschungen in DNA-Fragmenten in Verbindung mit Exonuklease III (5).

Hinweis:

S1 Nuclease kann bei hohen Enzymkonzentrationen und geringen Salzkonzentrationen zu Brüchen in doppelsträngiger DNA und RNA und doppelsträngigen DNA/RNA-Hybriden führen (6).