Thermo Scientific™ RevertAid Erststrang-cDNA-Synthesekit

Beschreibung

Das RevertAid Erststrang cDNA-Synthesekit ist ein Komplettsystem für die effiziente Synthese von Erststrang-cDNA aus RNA-Templates. Das Kit eignet sich für die Synthese von cDNA bis zu 13 kb. Der im Kit enthaltene RiboLock RNase-Inhibitor schützt RNA-Templates wirksam vor Abbau.

Das RevertAid Erststrang-cDNA-Synthese-Kit enthält sowohl Oligo(dT)₁₈- als auch Random-Hexamer-Primer. Der Oligo(dT)₁₈-Primer bindet selektiv an den Poly(A)-Schwanz der mRNA. Für Random-Hexamer-Primer ist ein Poly(A)-Ende nicht erforderlich. Sie können daher auch für die Transkription der Bereiche am 5'-Ende der mRNA oder für die cDNA-Synthese von RNA-Arten ohne Poly(A)-Ende (z. B. MikroRNAs) verwendet werden. Es können auch genspezifische Primer eingesetzt werden.

Das Kit umfasst RevertAid Reverse Transkriptase, die im Vergleich zur reversen AMV-Transkriptase eine niedrigere RNase-H-Aktivität aufweist. Der im Kit enthaltene rekombinante RiboLock RNase-Inhibitor schützt die RNA-Matrize wirksam vor Abbau. Er ist vollständig kompatibel mit der reversen Transkriptionsreaktion, da er die Aktivität bis zu einer Temperatur von 55 °C aufrecht erhält. Der Oligo(dT)₁₈-Primer bindet selektiv an den Poly(A)-Schwanz der mRNA. Für die Random-Hexamer-Primer ist die Gegenwart von Poly(A) nicht erforderlich. Daher können sie für die Transkription der 5-Endregionen von mRNA oder die cDNA-Synthese mittels RNA ohne Poly(A)-Schwanz (z. B. MikroRNA) verwendet werden. Es können auch genspezifische Primer eingesetzt werden. Der erste Strang der cDNA kann direkt als Templat bei der PCR (siehe RT-PCR-Protokoll), RT-PCR oder Synthese von Zweitstrang-cDNA (siehe Protokoll) eingesetzt werden.

• Erststrang-cDNA in voller Länge bis zu 13 kb
• Höhere Reaktionstemperaturen im Bereich von 42 bis 50 °C
• Rekombinanter RiboLock RNase-Inhibitor im Lieferumfang enthalten
• Komplett—Oligo(dT)₁₈ und Random-Hexamer-Primer sind im Kit enthalten

Empfohlen für:

cDNA-Erststrangsynthese für RT-PCR und Real-Time RT-PCR (1, 2); Erstellung von Bibliotheken von Volllängen-cDNA; Herstellung von Sonden für die Hybridisierung; aRNA-Synthese