Thermo Scientific™ Fast DNA End Repair Kit

Beschreibung

Der Fast DNA End-Reparatursatz wird für das Abstumpfen und die Phosphorylierung von DNA-Enden in nur gerade 5 Minuten verwendet, um sie anschließend für die Ligation am stumpfen Ende zu verwenden.

Alle Komponenten des Kits enthalten vorgemischte Reagenzien, um Pipettierschritte zu reduzieren und Komfort zu bieten. Das End-Reparatur-Enzymgemisch enthält eine optimierte Mischung aus T4-DNA-Polymerase und Klenow-Fragment, um eine hocheffektive Abstumpfung fragmentierter DNA zu erreichen, sowie T4-Polynukleotid-Kinase (PKN) für eine effiziente Phosphorylierung von DNA-Enden. Das 10X End-Reparatur-Reaktionsgemisch enthält einen optimierten Reaktionspuffer, ATP und dNTPs.

Proben wie fragmentierte genomische DNA (Restriktionsenzym verdaut, zerstäubt oder soniert), Plasmid-DNA mit verdautem Restriktionsenzym, doppelsträngige cDNA und PCR-Produkte, die dA-Überhänge enthalten, sind alle mit dem Kit kompatibel.

Überblick

Während der DNA-End-Reparaturreaktion wird fragmentierte DNA in stumpfe DNA umgewandelt, die eine 5'-Phosphat- und eine 3'-Hydroxylgruppe enthält. Die 5' → 3'-Polymeraseaktivität des End-Reparatur-Enzymgemischs füllt vorstehende 5'-DNA-Enden, während die 3' → 5'-Exonuklease-Aktivität 3'-Überhänge entfernt. T4 PNK fügt 5'-Phosphate an den Enden von nicht phosphorylierten DNA-Fragmenten, wie z. B. PCR-Produkten, hinzu.

Überblick

• Effizient – Abstumpfen und Phosphorylierung von 0,5 bis 5 µg DNA
• Schnell – Die Reaktion ist in 5 Minuten abgeschlossen
• Bequem – Reaktionskomponenten werden vorgemischt, um Pipettierschritte zu reduzieren