Thermo Scientific™ EasyPep™ MS Probenvorbereitungs-Kit

Beschreibung

Die EasyPep Mini MS-Probenvorbereitungskits ermöglichen die effiziente und reproduzierbare Verarbeitung von kultivierten Säugetierzellen, Geweben und Plasma für die proteomische MS-Analyse. Das Kit enthält vorformulierte Puffer, ein Enzym-Gemisch in MS-Qualität, Peptid-Aufreinigungssäulen und ein optimiertes Protokoll zur Erstellung von MS-kompatiblen Peptidproben in weniger als drei Stunden. Die Kits sind für die Verarbeitung von Proteinproben von 10 bis 100 μg mit einer hohen Ausbeute an MS-fähigen Peptiden optimiert.

• Vollständig—enthält vorformulierte Reagenzien für die Lyse durch Verdau sowie Peptid-Aufreinigungssäulen und ein optimiertes Protokoll für bis zu 20 Proben
• Optimiert—minimierte Anzahl an Schritten und weniger Zeitaufwand für die Probenverarbeitung durch vereinfachte Protokolle und Reagenzien
• Flexibel—Reagenzien und Protokolle wurden mit Zellen, Plasma und Gewebeproben für 10 bis 100 µg-Proben optimiert
• Zeitersparnis—von mehr als einem Tag auf weniger als drei Stunden verkürzte Verarbeitungszeit der Probe
• Kompatibel—Die Endvorbereitung eignet sich für die direkte MS-Analyse und andere nachfolgende Anwendungen, einschließlich TMT-Markierung.

Die Probenvorbereitung von Peptiden für die MS-Analyse ist aufgrund zahlreicher Schritte und verschiedener Protokolle komplex, was sowohl in Qualität als auch Quantität zu Probenvariabilität führt. Dieses Kit wurde entwickelt, um die Reproduzierbarkeit zu verbessern und gleichzeitig den Vorbereitungs- und Verarbeitungsaufwand zu verringern. Die Anzahl der Schritte und die Verarbeitungszeit wurden durch Zugabe einer Universal-Nuklease zur Reduzierung der Viskosität von Nukleinsäuren (anstelle der Schallexposition), einer schnellen „One-Pot“-Reduktionslösung für die Cystein-Modifikation (Carbamidomethylierung, +57,02) und einem Trypsin/Lys-C Protease-Mix für eine umfassendere Verdauung reduziert. Darüber hinaus enthält das Kit Peptid-Aufreinigungssäulen und Puffer zur Vorbereitung von reinigungsmittelfreien Peptidproben für die MS-Analyse. Die optimierten Reagenzien und das optimierte Protokoll erzeugen hochwertige Peptide, die direkt mit der TMT-Markierung, der Phosphopeptid-Anreicherung oder anderen nachfolgenden Anwendungen kompatibel bzw. bereit für die MS-Analyse sind.