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Invitrogen™ Retic Lysate IVT™ Kit
Effiziente Umwandlung von hochmolekularen Proteinen sowie gekappten und nicht gekappten mRNAs
Marke: Invitrogen™ AM1200
Beinhaltet: Retic Lysat sollte bei -80 °C gelagert werden. 20x Translation Mix Minus-Met, 20x Translation Mix minus-Leu, High Salt Mix minus-Met, Low Salt Mix minus-Met und Capped xEF-1-RNA sollten unter -70 °C gelagert werden. Nuklease-freies Wasser kann bei jeder Temperatur gelagert werden.
Beschreibung
Das Retic Lysat IVT™ Kit übersetzt effizient in vitro-synthetisierte Transkripte, Poly(A)-RNA und Gesamt-RNA, einschließlich schwer zu übersetzender RNAs. Das optimierte Lysat führt zu hoher Proteinausbeute, biologischer Aktivität und konsistenter Leistung. In einem Bericht in Nucleic Acids Research (1) wurde festgestellt, dass einige kommerzielle Retikulozyten-Lysate eine schlechte Wiedergabetreue für die Initiierung beim entsprechenden AUG-Initiator Codon hatten. Das Retic Lysat IVT-Kit wurde mit Kozaks Konstrukten getestet und zeigte eine hohe Wiedergabetreue für die Initiierung am richtigen AUG.
- Effiziente Translation einer Vielzahl von Proteinen mit hohem Molekulargewicht und mRNA mit und ohne Cap-Struktur
- Für ein großes Volumen an Vorlagen-mRNA
Das Lysat wurde für die Translation optimiert, indem ein ATP-regenerierendes System, ein Hämin und eine tRNA der Kalbsleber hinzugefügt wurden. Im Kit ist ein optimierter Translations-Mix (-Met oder -Leu) für die Translation von Nachrichten mit und ohne Cap-Struktur zusammen mit Puffern mit hohem und niedrigem Salzgehalt enthalten. Diese Puffer können zur Maximierung der Proteinausbeute und -aktivität von Sequenzen mit schwieriger Translation verwendet werden.
1. Kozak, M. (1990) Evaluation of the fidelity of initiation of translation in reticulocyte lysates from commercial sources. Nucleic Acids Res 18:2828.
Spezifikation
| • 5 × 200 µl (bei -80 °C lagern) • 2 × 1,75 ml nukleasefreies Wasser (bei beliebiger Temperatur lagern) • 100 µl 20X Translationsmix minus-Met • 100 µl 20X Translationsmix minus-Leu • 100 µl Mischung mit hohem Salzgehalt minus-Met • 100 µl Mischung mit niedrigem Salzgehalt minus-Met • 50 µl gecappte Xef-1-RNA (50 µg/ml) Die Reagenzien, sofern nicht anders angegeben, bei unter -70 °C lagern. Zellfreie Translationssysteme nicht in der Flüssigphase eines Flüssigstickstoff-Lagersystems lagern. |
|
| Wasserlösliches Protein | |
| Zellfrei | |
| 60 Reaktionen | |
| Elektrophoretisches Lysat | |
| Trockeneis |
| Kit | |
| Zellfreie Expression | |
| In-vitro-Transkription | |
| Ambion™ | |
| 60 Reaktionen |
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